
透射電子顯微鏡(transmission electron microscope, TEM)是利用透射電子成像,因而要求樣品薄(加速電壓100kV時,樣品厚度不能超過100nm)。其結(jié)構(gòu)包括三大部分:來實(shí)現(xiàn)高真空。由于油擴(kuò)散泵的啟動和關(guān)閉都需要30分鐘,導(dǎo)致TEM開機(jī)和關(guān)機(jī)都至少需要30分鐘。TEM發(fā)射出的高能電子束轟擊到光路元器件上以及樣品上,會產(chǎn)生以X-ray為主的等等其他射線輻射,因此建議孕婦等過敏性體質(zhì)者盡量避免接觸TEM。
由于平臺現(xiàn)有TEM的加速電壓為100kV,是一臺生物電鏡,因此無法滿足材料科學(xué)上要求的高放大倍數(shù)?0萬倍以上)、高分辨、衍射花樣等實(shí)驗(yàn)要求,有這方面需求的科研人員請與武大、地大等單位聯(lián)系。
TEM是研究結(jié)構(gòu)生物學(xué)的有力工具。除了電鏡之外,現(xiàn)在尚沒有一種儀器能使人們用肉眼直接觀察到亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)、蛋白大分子(直徑20nm以上)的排列結(jié)構(gòu)形態(tài)。利用電鏡觀察超TEM是研究超微結(jié)構(gòu)的工具之一,但它存在一些缺點(diǎn):(1)TEM的價格昂貴,維護(hù)費(fèi)用及其配件、耗材都在幾百甚至上千美元以上。(2)TEM的維護(hù)和使用均要求較高的技術(shù),也是一個精細(xì)、繁瑣的過程。TEM每3天要(3)TEM不能像光鏡那樣隨時可用,受到很多限制。TEM放大倍數(shù)有很多,再加上切片的限制,因此無法實(shí)現(xiàn)始終同一放大倍數(shù)的拍攝。(4)TEM樣品置于真空中,因此對活體標(biāo)本的觀察是不可能的。(5)TEM樣品取材及制要求只有1mm3大小塊狀,而且觀察面更小,如果把一個厚6μm的細(xì)胞核切成60nm的超薄切片,可以且100張,而一般光鏡的石蠟切片厚度即為6μm。如果要得到一張光鏡樣品切片的信息,就不得不記錄下100張超薄切片的信息,工作量就要增加了100倍。(6)TEM的焓右敖閑?,謸]?μm×9μm,當(dāng)放大10 000倍時,要想記錄1 mm2的標(biāo)本信息,就需要拍攝18 500張照片。因此在進(jìn)行電鏡觀察研究時,要有選擇性、有代表性地嚴(yán)格選擇樣品。
使用TEM前,首先要樹立一個概念:TEM不是光鏡的再放大,TEM的研究對象不是組織,