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疫苗的微觀形態(tài)
電子探針,顧名思義,是利用一束壓縮的細(xì)的高能電子束,在樣品上激發(fā)出二次電子、背散射電子及特征X射線等各種物理信號,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)納米尺度的微觀形態(tài)觀察以及任意指定位置的微區(qū)成分分析。
接下來就讓?shí)u津的電子探針顯微分析儀帶我們開啟一趟疫苗微觀世界的奇妙之旅吧。
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疫苗的微觀形態(tài)
以百白破疫苗為例,用移液槍吸取少量百白破疫苗,滴至粘有導(dǎo)電膠帶的鋁制樣品座上,自然風(fēng)干后噴鍍碳膜,上機(jī)測試。利用二次電子像在較低放大倍數(shù)下(600x)觀察疫苗微觀形態(tài),如圖2所示,可見疫苗顆粒呈明顯的團(tuán)簇狀。
對圖2黃色方框標(biāo)示位置在更大倍數(shù)(3000x)進(jìn)一步觀察疫苗顆粒的微觀細(xì)節(jié),結(jié)果如圖3所示;顆粒清晰可見,在大塊狀顆粒(紅色線條內(nèi))周圍包裹有大量絮狀物。對圖3大塊狀顆粒(紅色線條內(nèi))進(jìn)行微區(qū)成分定性分析,定性譜圖如圖4所示。
圖4 疫苗樣品大塊狀顆粒微區(qū)成分定性分析結(jié)果
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微區(qū)成分定性分析結(jié)果
由圖4定性譜圖可知,大塊狀顆粒物主量元素為O、Al,表明該大塊狀顆粒應(yīng)為百白破疫苗的重要組分之一——鋁佐劑,而其周邊包裹的大量絮狀物應(yīng)為抗原及其它結(jié)晶物;鋁佐劑對抗原的吸附和解吸附能力直接關(guān)系到疫苗的有效性和,就該疫苗而言,其所用鋁佐劑的吸附作用較強(qiáng),導(dǎo)致佐劑顆粒聚集成團(tuán),進(jìn)而表現(xiàn)為圖2中的大團(tuán)絮狀。
此外,微區(qū)成分定性結(jié)果中存在微量的P、Cl、Na、K元素,推測來自PBS緩沖液。PBS緩沖液是液體疫苗的重要組成部分,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,具有維持pH值和佐劑組成、zeta電勢等功能。從工藝過程推測,微量的Mg、Ca元素也來自緩沖液,作用是提供雙價陽離子;微量的Si元素,可能來自鋁佐劑的制備過程;微量的S元素可能來自蛋白質(zhì)和疫苗生產(chǎn)工藝中硫酸銨沉淀環(huán)節(jié)。
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