二．分光光度計(jì)有哪些不?的類(lèi)型，不同種類(lèi)的應(yīng)用領(lǐng)域有什么區(qū)別？

分光光度計(jì)有哪幾種不同的分類(lèi)方式：

1.分光光度計(jì)按照波長(zhǎng)及應(yīng)用領(lǐng)域的不同可以分為：（1）可見(jiàn)光分光光度計(jì)：測(cè)定波長(zhǎng)范圍為400～760 nm的可見(jiàn)光區(qū)；（2）紫外分光光度計(jì)：測(cè)定波長(zhǎng)范圍為200～400nm的紫外光區(qū)；（3）紅外分光光度計(jì)：測(cè)定波長(zhǎng)范圍為大于760nm的紅外光區(qū)；（4）熒光分光光度計(jì)：用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜；（5）原子吸收分光光度計(jì)：光源發(fā)出被測(cè)的特征光譜輻射，被經(jīng)過(guò)原子化器后的樣品蒸氣中的待測(cè)元素基態(tài)原子所吸收，通過(guò)測(cè)定特征輻射被m收的大小，來(lái)求出被測(cè)元素的含量。

2.分光光度計(jì)按自動(dòng)化程度分類(lèi)：可分為手動(dòng)、半自動(dòng)、自動(dòng)分光光度計(jì)。

3.分光光度計(jì)按軟件可分為：帶掃描、不帶掃描。

三．分光光度計(jì)常見(jiàn)的用途和常用波長(zhǎng)有哪些？

1.核m的定量

核酸的高吸收峰的吸收波長(zhǎng)260 nm。利用260nm的波長(zhǎng)可以定量測(cè)量溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA，以及RNA的濃度。

除了核酸濃度，分光光度計(jì)同時(shí)顯示幾個(gè)非常重要的比值表示樣品的純度。如A260/A280的比值，用于評(píng)估樣品的純度m因?yàn)榈鞍椎奈辗迨?80nm。純凈的樣品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白質(zhì)或者酚類(lèi)物質(zhì)的影響。

A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。

A320檢測(cè)溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品，A320一般是0。

2.蛋白質(zhì)的直接定量

這種方法是在280nm波長(zhǎng)，直接測(cè)試蛋白。選擇Warburg 公式，光度計(jì)可以直接顯示出樣品的濃度，或者是選擇相應(yīng)的換算方法，將吸光值轉(zhuǎn)換為樣品濃度。

3.細(xì)菌細(xì)胞密度

細(xì)菌培養(yǎng)過(guò)程中，需要采用分光光度計(jì)準(zhǔn)確測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。

OD600是追蹤液體培養(yǎng)物中微生物生長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)方法。在600nm波長(zhǎng)下，以未加菌液的培養(yǎng)液作為空白液，測(cè)量定量培養(yǎng)后的含菌培養(yǎng)液。

四．幾種常見(jiàn)d分光光度計(jì)的用途有哪些區(qū)別？

（1）可見(jiàn)分光光度計(jì)

用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光（400～760nm）的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器，稱(chēng)為可見(jiàn)分光光度計(jì)?？稍?00nm測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。

（2）紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)

紫外可見(jiàn)光譜儀用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光或紫外光（200～760nm）的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器。可以測(cè)定核酸和蛋白的濃度，也可以測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。

紫外分光光度計(jì)又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區(qū)別。

單光束